L'addition d'anticorps spécifiques à une suspension d'éléments
figurés portant les antigènes correspondants provoque leur
agglutination comme, par exemple, dans l'hémagglutination
où
les éléments figurés sont des globules rouges.
Des méthodes comparables de détection et de dosage d'anticorps
mettent à profit les propriétés agglutinantes des
anticorps vis à vis d'éléments inertes comme des particules
de carbone, de cholestérol ou de latex sur lesquelles ont été
fixés au préalable les antigènes appropriés.Le
sérodiagnostic de la syphilis est fondé sur ce principe.
La syphilis est une maladie infectieuse causée par un spirochète,
le tréponème pâle (Treponema pallidum). C'est
une maladie transmissible sexuellement et par le sang. Après avoir
régressé au cours du vingtième siècle, on observe
depuis quelques années une augmentation du nombre de nouveaux cas.
L'infection par le tréponème provoque la formation d'anticorps
anti-tréponème., notamment les réagines syphilitiques,
anticorps dirigés contre des phospholipides du tréponème
appelés antigènes de Wassermann. Ces antigènes présentent
une antigénicité croisée avec des cardiolipides présents
notamment dans le cœur des mammifères. La détection dans
un sérum de ces réagines (séropositivité) révèle
l'infection syphilitique.
La mise en évidence des réagines utilise des antigènes
cardiolipidiques couplés à un support inerte (globules rouges,
billes de latex, etc.) dont l'agglutination est facile à mettre
en évidence. La sensibilité de ce type de test est élevée
puisqu'elle permet de détecter des concentrations en anticorps aussi
basses qu'une dizaine de nanogrammes par mL. La détection des anticorps
peut-être simplement qualitative mais elle peut être rendue
quantitative si l'on utilise des dilutions connues du sérum à
tester.
Les réactifs de type VDRL (veneral disease research laboratory)
comportent des antigènes cardiolipidiques associés à
différents types de support. Le VDRL utilisé ici est un VDRL-latex
constitué de microparticules de latex portant les antigènes
cardiolipidiques.
Lorsque les particules de latex portant les antigènes cardiolipidiques
sont mises en présence d'un sérum positif, elles s'agglutinent
alors qu'elles ne s'agglutinent pas en présence d'un sérum
négatif.
L'agglutination peut être observée à l’œil nu ou
au microscope. |
Après sortie du réfrigérateur, laisser les réactifs
(sérum positif et VDRL-latex) revenir à la température
ambiante.
Agiter le VDRL-latex avant utilisation pour éviter la sédimentation
des particules au fond du flacon.
Matériel nécessaire
|
| Déposer trois fois 30 µL de VDRL-latex
sur une lame de microscope.
Dépôt du VDRL-latex
Ajouter 30 µL d'eau physiologique en face de la première
(témoin négatif), 30 µL de sérum de lapin immunisé
contre le tréponème en face de la seconde (témoin
positif) et 30 µL de sérum à tester en face de la troisième.
Si on ne dispose pas de pipette de précision, déposer
une goutte de chaque solution avec une pipette Pasteur ou une seringue
jetable. |
Agiter quelques instants par rotation de la lame.
La formation d'agglutinats est visible à l’œil nu au bout de
quelques minutes.
Résultats à l’œil nu
Témoin négatif à gauche.
Témoin positif au centre.
Sérum testé à droite (noter la séropositivité
révélée par la formation des agglutinats). |
| L'examen des gouttes au microscope à faible grossissement
permet de confirmer la formation des agglutinats : |
Résultat négatif
(microscope optique x 100)
|
Résultat positif
(microscope optique x 100)
|
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Kit comportant l'ensemble des produits nécessaires :
APBG (Association
des Professeurs de Biologie Géologie)
BP 8337
69356 Lyon Cedex 08
Téléphone : 04 78 74 47 22
Fax : 04 78 01 22 14
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Produits individuels :
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3 boulevard Raymond Poincare
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