Lorsqu'un nerf est en activité, il est parcouru par des messages
nerveux se traduisant par une activité électrique globale
qu'il est possible d'enregistrer après l'avoir amplifiée.
L'utilisation
des animaux vertébrés étant prohibée dans l'enseignement,
il est nécessaire d'utiliser des invertébrés pour
étudier de façon pratique les réponses d'un nerf à
des stimulations. Les crabes constituent un matériel approprié
pour ce type de travaux en raison de la facilité à se procurer
ces animaux à un faible coût et du peu de difficulté
à isoler les nerfs sensorimoteurs des pattes locomotrices. Une fois
le nerf disséqué et placé sur les électrodes
d'une cuve à nerf, les réponse à
divers types de stimulations électriques peuvent être visualisées
sur un écran d'oscilloscope ou avec un système d'ExAO. Il
est ainsi possible de déterminer le seuil d'excitabilité
du nerf et de ses différents groupes de fibres, leur vitesse de
conduction, les périodes réfractaires relative et absolue,
les réactions du nerf à des modifications de la composition
du milieu de survie, etc. Le schéma ci-dessous montre les principes
du montage expérimental :
Plusieurs espèces de crabes peuvent être utilisées
: crabe enragé, crabe vert, tourteau, étrille. Il est possible
de se procurer des crabes vivants chez les marchands de poisson, sur les
marchés et dans certains supermarchés. Il est également
possible, quoique plus coûteux, de les commander
auprès d'une station biologique.
Dissection
du nerf
Amputer l'animal de l'une de ses pattes locomotrices au niveau de l'articulation
avec le thorax.
Patte N° 5 de C. moenas
Patte N° 4 de C. moenas
Saisir le troisième segment de la patte en partant de l'extrémité
distale (carpopodite) dans la main gauche et le deuxième article
(propodite) entre le pouce et l'index de la main droite.
Désarticuler soigneusement la patte entre les segments 2 et 3 par
des mouvements de va et vient d'avant en arrière et de haut en bas.
Tirer lentement, régulièrement mais fermement en maintenant
la base de la patte en position rectiligne. Le nerf sensorimoteur de la
patte reste attaché aux segments 2 et 1.
Transférer le nerf attaché aux segments 2 et 1 dans du liquide
physiologique pour nerf de crabe oxygéné (bullage d'air
avec une pompe d'aquarium) et le laisser reposer au minimum une quinzaine
de minutes.
Segments terminaux de la patte du crabe Carcinus moenas avec
le nerf attaché. Noter la séparation du nerf en deux groupes de fibres (elle
se produit spontanément dans le liquide physiologique et peut être
prévenue par une ligature).
Au cours des manipulations, remettre le nerf dans ce milieu s'il cesse
de répondre aux stimulations.
Remarques, trucs & astuces
Veiller à la bonne oxygénation du milieu de survie en y laissant
buller de l'air.
Vérifier le pH du milieu et l'ajuster à 7,2-7,4 le cas échéant.
Veiller à maintenir une atmosphère humide dans la cuve en
plaçant quelques gouttes de liquide physiologique au fond de la
cuve qui doit être maintenue fermée.
Si l'on désire empêcher la séparation des groupes de
fibres dans le liquide physiologique, placer une ligature à l'extrémité
distale du nerf.
Montage
Installer le nerf sur les électrodes d'une cuve à nerf au
fond de laquelle auront été placées quelques gouttes
de liquide physiologique. Veiller à placer la partie du nerf encore
racordée au propodite du côté des électrodes
excitatrices.
Déposer une goutte de liquide physiologique au niveau des contacts
entre nerf et électrodes.
Fermer la cuve.
Remarque
Selon le type de matériel d'ExAO utilisé, les détails
du montage peuvent varier. Toutefois, quel que soit le matériel,
on placera les électrodes stimulatrices en "cathode descendante",
c'est à dire avec l'électrode négative (cathode) placée
entre l'électrode stimulatrice positive (anode) et la première
électrode réceptrice.
Le schéma ci-dessous montre le montage réalisé
avec les systèmes ESAO3 ou ESAO4 (Jeulin) :
Crabes :
Station
biologique de Roscoff :
http://www.sb-roscoff.fr/ModBiol/liste.html NB On peut aussi trouver des crabes vivants chez les poissonniers. Cuve à nerf :
Etablissements du Docteur Auzoux
9, rue de l'Ecole de Médecine
75006 Paris
01 43 26 45 81
Station
biologique de Roscoff :
