- L'aspect sensiblement différent de
ces deux hépatocytes s'explique par le fait qu'ils ont été fixés
diversement :
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- soit simplement au glutaraldéhyde (à droite)
- soit en 2 étapes, la fixation au glutaraldéhyde étant
suivie d'une postfixation par le tétroxyde d'osmium ("acide
osmique"
: OsO4) (à gauche).
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-
- 1 - Une comparaison des deux
images permet de mettre en évidence les avantages/inconvénients
respectifs des deux modes de fixation :
-
- une postfixation par le tétroxyde
d'osmium (image de gauche ) est indispensable à la
visualisation des constituants membranaires de la cellule (membranes
et crêtes mitochondriales, membranes du réticulum
endoplasmique granulaire et lisse, membranes de l'enveloppe nucléaire)
ainsi qu'à celle des rosettes de glycogène - lesquelles
demeurent transparentes aux électrons en l'absence d'acide
osmique (image de droite).
- en revanche, certaines catégories
de protéines, qui sont préservées par le glutaraldéhyde,
sont ensuite partiellement extraites par l'acide osmique. Un tel
effet se montre spectaculaire au niveau du noyau, dont, par exemple,
les espaces interchromatiniens apparaissent "vidés" après
une postfixation osmiée (image de gauche),
alors qu'ils sont occupés par un matériel finement dispersé en
son absence (image de droite) .
Il est donc utile, si l'on veut explorer l'ultrastructure
des noyaux cellulaires, de disposer d'échantillons des deux
types.
2 - Si l'on se repère aisément, malgré tout,
dans le cytoplasme - en tout cas après une double fixation
- l'aspect du noyau en revanche, moins familier, apparaît peu
lisible.
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