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Les éléments figurés du sang : réalisation d'un frottis sanguin

Didier Pol

I. Principe

Du sang animal  est utilisé pour réaliser un frottis coloré par une technique de coloration rapide (variante de la coloration de May-Grünwald-Giemsa) de façon à observer au microscope les éléments figurés.
Le sang animal (sang défibriné de mouton ou de cheval) est obtenu dans le commerce (Bio-Rad).

II. Protocole

• Déposer une goutte de sang la plus petite possible (sang animal : mouton ou cheval) à l'extrémité d'une lame avec une pipette Pasteur.
• Placer sur la goutte une lamelle inclinée à 45° de façon à ce que le sang s'étale sous la lamelle par capillarité.
• Faire glisser la lamelle maintenue à 45° le long de la lame pour étaler uniformément la goutte.
• Sécher la lame en l'agitant dans l'air.
• Tremper la lame 5 fois de suite pendant une seconde dans le fixateur et bien égoutter sur papier filtre.
• Tremper la lame 5 fois de suite pendant une seconde dans le colorant 1 et bien égoutter sur papier filtre.
• Tremper la lame 5 fois de suite pendant une seconde dans le colorant 2, bien égoutter sur papier filtre puis rincer à l'eau distillée en commençant par enlever l'excès de colorant sur le dos de la lame puis en laissant couler doucement l'eau distillée sur le frottis.

III. Résultats

Coloration de May-Grünwald Giemsa simplifiée réalisée avec un kit RAL 555

Frottis de sang de mouton x 400	Frottis de sang de mouton x 400

Frottis de sang de mouton x 900 (objectif à immersion)

IV. Matériel

Réactifs RAL :
Bordeaux Technopolis-Site Montesquieu
33650 Martillac
Téléphone : 05 57 96 04 04
Télécopie : 05 57 96 04 05

Bio-Rad Laboratories S.A.
3 boulevard Raymond Poincare
92430 Marnes La Coquette
France
Phone: 33 1 47 95 60 00
Fax: 33 1 47 41 91 33
On peut, en général, se procurer du sang frais auprès de son boucher en lui fournissant un flacon contenant du citrate de sodium pour qu'il le fasse remplir à l'abattoir avec du sang de porc, de boeuf, etc.

Professeur Lafleur

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