Protocoles expérimentaux

Culture de cyanobactéries

Marie Jeanne Pellerin - Lycée Charles le chauve - 4, rue Joseph Bodin de Boismortier, 77680 Roissy en Brie

Sommaire

1. Milieu
2. Contenants
3. Eclairement
4. Conduite des cultures

I. Le milieu : elles poussent sur un milieu minéral

Composition pour 1 litre d’eau distillée :

1 - nitrate de sodium Na NO3 : 1,5 g
2 - monohydrogénophosphate de potassium, K2HPO4 : 31 mg
3 - sulfate de magnesium heptahydraté, Mg SO4, 7 H2O : 75mg
4 - Chlorure de calcium dihydraté, Ca Cl2, 2H2O : 36 mg
5 - acide citrique monohydraté : 7 mg
6 - EDTA disodique : 1mg
7 - carbonate de sodium, Na2CO3 : 20 mg
8 - citrate de fer ammoniacal : 6 mg
9 - y ajouter 1ml de mélange "métaux"

Mélange "métaux" : composition pour 250 ml d’eau distillée

1 - H3 Bo4 : 715 mg
2 - Mn Cl2, 4 H2O : 452 mg
3 - Zn SO4, 7 H2O : 56 mg
4 - Na2 Mo O4, 2H2O : 97 mg
5 - Cu SO4, 5 H2O : 20 mg
6 - Co(NO3) 2, 6 H2O: 12,5 mg

On peut élever les cyanobactéries sur milieu gélosé, ajouter alors 7g d’agar par litre de milieu.

Stériliser le milieu 20 minutes à 130°C.

On trouve ce milieu tout prêt chez Sigma :

L’Isle d’Abeau Chesnes -BP 701
38297-SAINT QUENTIN FALLAVIER CEDEX Télécopie : 04 74 95 68 08
C 3061: Cyanobacteria BG 11 freschwater .....176 F HT les 500ml
la solution vendue est concentrée 50X, (on met donc 20 ml de solution dans 980 ml d’eau distillée) ce qui met le litre de BG11 à 7F HT.

II. Les contenants


On peut les installer dans des tubes à essais stériles pour culture in vitro, dans un erlenmeyer stérile bouché par un tampon de gaze recouvert d’un papier d’aluminium, des petits pots de bébé stériles à couvercles transparents autoclavables etc... Tous les récipients stérilisables et transparents conviennent. Ne pas mettre trop de liquide afin d’assurer une bonne aération du milieu, utiliser dans ce même objectif des fermetures ventilées.

III. L’éclairement

Elles ont impérativement besoin de lumière mais celle-ci ne doit pas être trop forte. En plein soleil devant une fenêtre est une méthode quasi-certaine pour les détruire. En revanche, leur installation sous un néon horticole 24 heures sur 24 leur convient très bien.

Si la lumière est un peu forte on peut la tempérer avec un papier sulfurisé posé par dessus les cultures. Elle prolifèrent bien à la température normale d’une pièce.

IV. La conduite des cultures

 

Les souches sont repiquées tous les 3 à 6 mois selon les variétés. Elles prolifèrent assez lentement : Il faut compter 5 à 6 semaines pour obtenir un bon développement du repiquage.

 

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