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MICROSCOPIE à FLUORESCENCE

Un microscope à fluorescence est un microscope photonique équipé de deux lampes, une lampe ordinaire pour une observation classique par transmission et une lampe à arc pour la fluorescence. Des filtres d'excitation permettent de choisir la longueur d'onde incidente et des filtres d'émission (ou d'arrêt) permettent de sélectionner les radiations émises par l'objet excité.

Un microscope équipé en épifluorescence est pourvu de plusieurs jeux de filtres correspondant aux fluorochromes les plus habituellement utilisés. Chaque jeu de filtres est constitué d'un filtre d'excitation, d'un miroir dichroïque et d'un filtre d'émission. Les fluorochromes les plus classiques sont la rhodamine et ses dérivés, la fluorescéine et ses dérivés et le DAPI. Ils émettent respectivement dans le rouge, le vert et le bleu.

La fluorescence observée peut avoir plusieurs origines :

Trois exemples d'utilisation de la fluorescence : choix du fluorochrome, caractéristiques optiques du fluorochrome, spectres des filtres et résultats d'une expérience.

Comment obtenir des images complexes comportant plusieurs fluorescences de longueurs d'onde différentes?

Une page d'album :

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Caroline Benlot, Nicole Blanchouin, Michel Delarue, Michèle Mosiniak, Roger Prat et Véronique Vonarx
Collaboration : Philippe Guillaud
© Copyright "Biologie et Multimédia"

Mise en ligne : septembre 1999
Dernière modification : juillet 2002