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Mouvements d'eau à travers la membrane
plasmique des globules rouges
  • Principe

  • Des globules rouges de mouton sont placés dans trois solutions dont les concentrations correspondent respectivement à un milieu hypotonique (eau distillée), isotonique (chlorure de sodium à 9 g/L) et hypertonique (chlorure de sodium à 12 à 30 g/L selon l'origine du sang utilisé). La différence de concentration des milieux intracellulaire et extracellulaire provoque un flux net d'eau à travers la membrane cytoplasmique (respectivement entrant, nul ou sortant). L'aspect pris par les globules rouges montre le sens du flux net d'eau.
     
  • Protocole
    • Verser 0,5 mL de sang défibriné du commerce (sang animal : cheval, mouton) dans 3 tubes à hémolyse.
    • Compléter le tube 1 avec de l'eau distillée, le tube 2 avec une solution de NaCl à 9 g/L et le tube 3 avec une solution de NaCl à 30 g/L (voir note de bas de page*).
    • Laisser reposer dix à quinze minutes en agitant de temps en temps.
    • Prélever une goutte au fond de chaque tube et les déposer sur une lame sans qu'elles se touchent.
    • Recouvrir chaque goutte avec une lamelle et observer au microscope.

    •  
  • Résultats
Les cellules placées dans l'eau distillée gonflent puis éclatent (hémolyse) en raison de l'entrée d'eau. L'examen microscopique ne montre donc aucun élément figuré. Au contraire, les cellules placées dans un milieu isotonique (cliché 1) ou hypertonique (cliché 2) restent visibles au microscope.
1. Globules rouges de mouton (x400)
Milieu isotonique (NaCl 9g/L)
Noter l'aspect normal des globules rouges
2. Globules rouges de mouton (x 400)
Milieu hypertonique (NaCl 30g/L)
Noter l'aspect crénelé des globules rouges
* Les valeurs données ici sont celles éprouvées par expérience pour du sang de mouton du commerce conditionné en flacon.
Si l'on utilise du sang animal frais, une concentration de 12g/L est suffisante pour obtenir la plasmolyse.

Bio-Rad Laboratories S.A.
3 boulevard Raymond Poincare
92430 Marnes La Coquette
France
Phone: 33 1 47 95 60 00
Fax: 33 1 47 41 91 33
On peut, en général, se procurer du sang frais auprès de son boucher en lui fournissant un flacon contenant du citrate de sodium pour qu'il le fasse remplir à l'abattoir avec du sang de porc, de boeuf, etc.

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